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    液相色谱柱使用说明
    来源: | 作者:bjzkhf | 发布时间: 2014-08-08 | 6314 次浏览 | 分享到:
    液相色谱柱都是按照严格的标准生产和测试的,如能按照以下信息使用和维护色谱柱,不但能得到更佳的检测结果,更能够延长色谱柱的使用寿命。


    色谱柱的安装:


    1ope体育官方、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配ope体育官方。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装?;ぶ?。


    2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果,应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱,建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况ope体育官方ope体育官方,避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。


    3、使用PEEK 材料的通用接头,只需用手拧紧不需要特定扳手ope体育官方,使用压力为5000psiope体育官方;使用温度不得超过100℃。


    流动相平衡:


    1ope体育官方、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生ope体育官方ope体育官方。


    2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏?;撼逡河肫渌鞫嗷旌虾笥χ匦鹿吮苊馊芙舛缺浠斐刹碌某恋?。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱ope体育官方,以免柱性能损坏(添加5%的有机溶剂冲洗色谱柱,同时可以达到对缓冲盐清洗的作用?ope体育官方;箍梢允股字菀灼胶猓?。


    3、流动相需脱气后使用,可避免因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。如果测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区别,应该使用过度分布的形式进行平衡。避免由于流动相的突然变化造成柱压增加过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏ope体育官方。正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间ope体育官方。


    样品制备与操作:


    1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中ope体育官方。除特殊指明外ope体育官方,如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。


    2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤ope体育官方。频繁改变流动相组成,会加速降低柱效。


    3ope体育官方、色谱柱由高压匀浆法装填,能承受较高压力。为获得最佳分离效果,使用时请不要超过200kgf,而且避免压力突然上升或变化,否则会造成硅胶填料的破坏,减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外最高操作温度不要超过60℃。


    保存色谱柱:


    1、如果流动相含有酸或无机盐ope体育官方,应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。最后用柱子的接头密封,并放在稳定的环境中存放。


    2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低。


    色谱柱的再生:


    1、用相当于20倍柱体积的溶剂按下列顺序冲洗柱子ope体育官方,建议按柱子的箭头方向冲洗,尽可能不反冲:冲洗时使用的的参考溶剂顺序是水、甲醇、氯仿ope体育官方、异丙醇、甲醇ope体育官方。
     
     

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